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抗Ⅲ抗体Elisa试剂盒在试验条件(包含试剂)较难确保稳定的情况下,这种判别法较为合适。在得出标本(S)和阴性对照(N)的A值后,核算S/N值。也有写作P/N的,这儿的P不代表阳性(positive),而是病(patient)的缩写,不应误解。为防止混杂,更宜用S/N表示。在前期的间接法ELISA试剂盒中,有些作者定出S/N为阳性规范,现多为各种测定所沿用。
现举某种检测HBsAg的试剂盒为例。试剂盒中的阴性对照品为不含HBsAg的复钙人血浆,阳性对照品HBsAg的含量标明为P=9±2ng/ml。每次试验设2个阳性对照和3个阴性对照。测得A值后,先核算阴性对照A值的平均数(NCX)和阳性对照A值的平均数(PCX),两个平均数的差(P-N)有必要大于一个特定的数值(例0.400),试验才有用。3个阴性对照A值均应≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此规模,则弃去,罢了另两个阴性对照从头核算NCX;如有两个阴性对照A值超出以上规模,则该次试验无效。
实际上每一测定体系应该用试验求出各自的S/N的阈值。更应留意的是,N所代表的阴性对照是不含受检物质的人血清。有的试剂盒中所设阴性对照为不含蛋白质或蛋白质含量较底的缓冲液,致使反响后发生的本底可能较正常人血清的本底低得多。阳性断定值(cut-off value)一般为阴性对照A值加上一个特定的常数,以此作为判别成果阳性或阴性的规范。抗Ⅲ抗体Elisa试剂盒用此法判别成果要求试验条件非常稳定,阳性和阴性的对照品应契合必定的标准,须配用精细的仪器,并严格按规则操作。阳性断定值公式中的常数是在这特定的体系中通过对很多标本的试验检测而得到的。
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