蛋白磷酸酶抑制剂混合液III型荧光定量PCR实验步骤：

①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其*溶解。

②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。

③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。

④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其*溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。

转录因子E2F-1抗体

内皮素转化酶1抗体

细胞外基质蛋白1抗体

外胚层发育不良抗体

E2 tag标签抗体

铁螯合酶抗体

DH5α大肠杆菌菌体蛋白抗体

磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体

上皮细胞粘附分子抗体

表皮生长因子抗体

表皮生长因子受体3抗体

上皮钙粘附分子抗体

红细胞生成素受体抗体

脑啡肽抗体

EID2蛋白抗体

上皮细胞粘附分子抗体

红细胞膜相关蛋白ERMAP抗体

腺样癌特异性相关抗原抗体EMC1抗体

腺样癌特异性相关抗原抗体EMC1抗体

染色体区域稳定蛋白/核输出蛋白1抗体

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