- GSG 酶联十大免费最污黄色软件下载分析试剂盒实现对目标分子的高灵敏度检测
- 猫促甲状腺素(TSH)elisa试剂盒?优惠活动
- Wnt-3a蛋白Elisa试剂盒热在年货情暖冬日
- GSH 酶联十大免费最污黄色软件下载分析试剂盒灵敏度高
- 类人猿十大免费最污黄色软件下载球蛋白G4(IgG4)elisa试剂盒?正在进行优惠活动
- 大鼠磷脂酶A2(PL-A2)elisa试剂盒?折扣优惠活动
- 年底了,蛋白激酶c eta型ELISA检测试剂盒?正在打折
- 甲型流感H5N1(Avian Flu)HA elisa试剂盒?折扣优惠活动开始了
- VE Elisa Kit:疫苗有效性分析
- 山羊M型肌酸激酶(CKM)elisa试剂盒?优惠活动
鸡多巴胺(DA)elisa试剂盒操作步骤
1. 标准品的稀释: 本试剂盒提供原倍标准品一支, 用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
100pg/ml 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液
50pg/ml 4 号标准品 150μl 的 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
25pg/ml 3 号标准品 150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
12.5pg/ml 2 号标准品 150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
6.25pg/ml 1 号标准品 150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同) 、标准孔、待测样品孔。 在酶标包被板上标准品准确加样 50μl, 待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样品zui终稀释度为 5 倍) 。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
8. 洗涤:操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
10 分钟.
10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色) 。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值) 。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式, 将样品的 OD 值代入方程式, 计算出样品浓度, 再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
上一篇 人肌球蛋白ELISA检测试剂盒注意事项 下一篇 人ω干扰素(IFN-ω)ELISA试剂盒标本收集步骤