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ELISA试剂盒实验中怎么挑选*化的包被条件
点击次数:728 更新时间:2018-11-01
1.包被抗原的挑选
ELISA试剂盒包被抗原可分为天然蛋白、重组蛋白和小分子抗原三大类。天然蛋白需经纯化才能用直接吸附法包被,关于含杂质较多的抗原能够选用直接捕获法包被(先用能够与意图抗原反响的物质如抗体直接吸附在酶标板上,再经过特异性反响使抗原固相化)。经纯化的重组蛋白一般皆可直接包板。小分子抗原比方多肽以及一些小分子有机化合物,由于分子量太小,往往难于直接吸附在酶标板上,一般都先使其与无关蛋白质如BSA等偶联,偶联物吸附于固相载体上。
2.包被液的挑选
一般常用的是pH9.6的碳酸盐缓冲液,假如包被的抗原在碱性条件下不稳定的话,也能够运用pH7.2的磷酸盐缓冲液。
3.包被温度的挑选
通常是4-8度条件下24小时后或许37度保温2小时,咱们强烈建议4-8度条件下包被,有利于蛋白活性的保持。