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HK-2 人肾皮质近曲小管上皮细胞?培养基及培养冻存条件准备
点击次数:11 更新时间:2024-01-08
HK-2 人肾皮质近曲小管上皮细胞培养基及培养冻存条件准备:
1)准备 角质细胞无血清培养基或者 Defined K-SFM ,添加对应因子,1% P/S 来培养细胞。
备注:Defined K-SFM培养液包含两个组份:基础培养基1瓶+生长因子1管
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:培养液92.5%,7.5%DMSO,现用现配。
4)传代比例:如果没有特别说明,收到细胞后的第一次传代一般是1:2。传代周期:4-6天,换液频率:每周 2-3次。
备注:
1. 该细胞贴壁较慢,为使细胞贴壁更容易,建议可提前在培养皿/培养瓶中铺0.25%的明胶溶液,并于贴壁24~48小时后再进行后续操作。
2. 该细胞生长不能过密,请在生长密度80%时进行传代。
3.使用0.05%消化细胞,由于Defined K-SFM为无血清培养液无法终止消化,所以消化完成后要通过离心(建议125xg离心5到10分钟)去除或者用带10%血清的培养基来终止消化,再进行后续操作。