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Hcy Elisa 试剂盒常用的方法有哪几种?
点击次数:254 更新时间:2022-07-27
  Hcy Elisa 试剂盒是一种广泛应用在测定液体样本中的蛋白、抗体、或激素的十大免费最污黄色软件下载分析技术。酶联十大免费最污黄色软件下载吸附试验的标准程序,通常是把蛋白、抗体、或激素等(即抗原)直接或是以捕捉抗体固定在固相载体上,再加入一级检测抗体,形成一个抗原抗体的复合物。如果该抗体已经用酶标记了,即可用来直接测定抗原的量,若无,则可利用另一个酶标记的二级抗体来测定抗原的量。测定抗原量的方法是加入该酶的底质,作用后产生出现的颜色深浅和样本中的抗原量呈正比的关系,依此原理计算出样本中的抗原总量或浓度。
  1.直接法(direct ELISA)
  将抗原直接固定在固相载体上,加入酶标记的一级抗体,即可测定抗原总量,此一级抗体的特异性非常重要。
  优势:操作手续简短,因无须使用二抗可避免交互反应。
  缺点:试验中的一抗都得用酶标记,但不是每种抗体都适合做标记,费用相对提高。
  2.间接法(indirect ELISA)
  此测定方法与直接法类似,差别在于一级抗体没有酶标记,改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。
  优势:Hcy Elisa 试剂盒二抗可以加强信号,而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的一级抗体则能保留它多的十大免费最污黄色软件下载反应性。
  缺点:交互反应发生的机率较高。
  3.双抗体夹心法(sandwich ELISA)
  被检测的抗原包被在两个抗体之间,其中一个抗体将抗原固定于固相载体上,即捕捉抗体。另一个则是检测抗体,此抗体可用酶标记后直接测定抗原的量;或不标记,再透过酶标记的二级抗体来测定抗原的量。这两种抗体必须小心选取,才可避免交互反应或竞争相同的抗原结合部位。
  优势:高灵敏、高专一性,抗原无须事先纯化。
  缺点:抗原一定得拥有两个以上的抗体结合部位。
  4.竞争法(competitive ELISA)
  样本里的抗原(自由抗原)和纯化并固定在固相载体上的抗原(固定抗原)一起竞争相同的抗体,当样品里的自由抗原越多,就可以结合越多的抗体,而固定抗原就只能结合到较少的抗体,反之亦然。经清洗步骤,洗去自由抗原和抗体的复合物,只留下固定抗原和抗体的复合物,拿来与只有固定抗原的对照组结果相比较,根据呈色差异就可计算出样品里的抗原含量。
  优势:可适用比较不纯的样本,而且数据再现性很高。
  缺点:Hcy Elisa 试剂盒整体的敏感性和专一性都较差。
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